化學發光分析技術是現代微量分析方法之一，由于其靈敏度高(可達10-18mol)、簡便快速(計數1秒/管)、線性好(可兩點校準標準曲線)、有效期長(可達1年)、安全無害(無放射性和致畸物污染)等優點而成為取代放免和酶聯的重要技術。

　　

　　辣根過氧化酶使試劑中的發光物（luminol）氧化并發光，而試劑中含有增強劑這使得發光增強了1000倍。在免疫印跡中，將復雜的蛋白混合物經sds-page分離，并轉移到固相膜上（如nc、pvdf）等，用于免疫學檢測，經HRP標記的抗體與膜上的蛋白直接（標記一抗）或間接（標記二抗）反應。

　　

　　在如今的Westernblot實驗中，化學發光檢測是常用的檢測方法。相對于顯色檢測和熒光檢測而言，它的靈敏度非常高，可達到飛克級（fg）。自從增強型化學發光（ECL）檢測問世以來，這種方法就受到了*科研工作者的喜愛。

　　

　　化學發光檢測通常使用的是辣根過氧化物酶（HRP）。它催化底物魯米諾（luminol）的氧化，同時生成光信號。這些信號可通過X光膠片的曝光來檢測，或直接在與化學發光兼容的CCD成像系統上獲取圖像。當然，后一種方式更方便，也更流行。

　　

　　用途：

　　

　　該底物試劑與堿性磷酸酶（ALP）混合后，堿性磷酸酶磷酸根水解后，底物立即發生分解反應釋放出光子，在特定的堿性磷酸酶濃度范圍內，釋放的光子數量與溶液中堿性磷酸酶的濃度成正比，所以可以用于堿性磷酸酶的定量檢測。

　　

　　應用領域：

　　

　　1堿性磷酸酶發光檢測；

　　

　　2.ELISA化學發光檢測；

　　

　　3.WB化學發光檢測；

　　

　　4.其他酶聯化學發光反應檢測。